昆明理工大學醫學院 生理學實驗報告
(供臨床醫學專業使用 )
實驗一 一 坐骨神經— 腓腸肌標本制備 [ [1] ]
實驗目得
1、學習機能學實驗基本得組織分離技術; 2、學習與掌握制備蛙類坐骨神經-腓腸肌標本得方法; 3、了解刺激得種類。
[2 2] 實驗原理
蛙類得一些基本生命活動與生理功能與恒溫動物相似,若將蛙得神經—肌肉標本放在任氏液中,其興奮性在幾個小時內可保持不變。若給神經或肌肉一次適宜刺激,可在神經與肌肉上產生一個動作電位,肉眼可瞧到肌肉收縮與舒張一次,表明神經與肌肉產生了一次興奮。在機能學實驗中常利用蛙得坐骨神經-腓腸肌標本研究神經、肌肉得興奮、興奮性,刺激與反應得規律與肌肉收縮得特征等,制備坐骨神經腓腸肌標本就是機能學實驗得一項基本操作技術。
[3] ]
實驗對象 蛙 [ [4] 實驗藥品 任氏液 [ 5] 儀器與器械
普通剪刀、手術剪、眼科鑷(或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細線、培養皿、滴管、電子刺激器. [6 ] 實驗方法與步驟 ① 破壞腦、脊髓 取蛙一只,用自來水沖洗干凈(勿用手搓)。左手握住蛙,使其背部向上,用大拇指或食指使頭前俯(以頭顱后緣稍稍拱起為宜).右手持探針由頭顱后緣得枕骨大孔處垂直刺入椎管
(圖 3—1-1)。然后將探針改向前刺入顱腔內,左右攪動探針2~3 次,搗毀腦組織。如果探針在顱腔內,應有碰及顱底骨得感覺。
再將探針退回至枕骨大孔,使針尖轉向尾端,捻動探針使其刺入椎管,搗毀脊髓。此時應注意將脊柱保持平直。針進入椎管得感覺就是,進針時有一定得阻力,而且隨著進針蛙出現下肢僵直或尿失禁現象。若腦與脊髓破壞完全,蛙下頜呼吸運動消失,四肢完全松軟,失去一切反射活動.此時可將探針反向捻動,退出椎管。如蛙仍有反射活動,表示腦與脊髓破壞不徹底,應重新破壞。
圖 2-1-1 搗毀蟾蜍脊髓 ② 剪除軀干上部、皮膚及內臟
用左手捏住蛙得脊柱,右手持粗剪刀在前肢腋窩處連同皮膚、腹肌、脊柱一并剪斷(圖3-1-2),然后左手握住蛙得后肢,緊靠脊柱兩側將腹壁及內臟剪去(注意避開坐骨神經),并剪去肛門周圍得皮膚,留下脊柱與后肢(圖2—1-3)。
圖2-1-2 橫斷脊柱
圖 2-1-3 剪除軀干上部及內臟 ③ 剝皮
一只手捏住脊柱得斷端(注意不要捏住脊柱兩側得神經),另一只手捏住其皮膚得邊緣,向下剝去全部后肢得皮膚(圖 2-1—4)。將標本放在干凈得任氏液中.將手及使用過得探針、剪刀全部沖洗干凈.
圖 2—1-4 剝去皮膚 ④ 分離兩腿
用鑷子取出標本,左手捏住脊柱斷端,使標本背面朝上,右手用粗剪刀剪去突出得骶骨(也可不進行此步).然后將脊柱腹側向上,左手得兩個手指捏住脊柱斷端得橫突,另一手指將兩后肢擔起,形成一個平面。此時用粗剪刀沿正中線將脊柱盆骨分為兩半(注意勿傷坐骨神經)。將其中一半后肢標本置于盛有任氏液中備用,另一半放在蛙板上進行下列操作. ⑤ 辯認蛙后肢得主要肌肉 蛙類得坐骨神經就是由第 7、8、9 對脊神經從相對應得椎間孔穿出匯合而成,行走于脊柱得兩側,到尾端(肛門處)繞過坐骨聯合,到達后肢背側,行走于梨狀肌下得股二頭肌與半膜肌之間得坐骨神經溝內,到達膝關節腘窩處有分支進入腓腸肌。
⑥ 游離坐骨神經與腓腸肌 用蛙釘或左手得兩個手指將標本繃直、固定。先在腹腔面用玻璃分針沿脊柱游離坐骨神經,然后在標本得背側于股二頭肌與半膜肌得肌肉縫內將坐骨神經與周邊得結締組織分離直到腘窩,但不要傷及神經,其分支待以后用手術剪剪斷。同樣用玻璃分針將腓腸肌與其下得結締組織分離并在其跟腱處穿線、結扎。
⑦ 剪去其它不用得組織,操作應從脊柱向小腿方向進行。
(a)
剪去多余得脊柱與肌肉
將后肢標本腹面向上,將坐骨神經連同 2~3 節脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下來.再將標本背面向上,用鑷子輕輕提起脊椎,自上而下剪去支配腓腸肌以外得神經分支,直至腘窩(圖3—1-5A),并搭放在腓腸肌上。沿膝關節剪去股骨周圍得肌肉,并將股骨刮凈,用粗剪刀剪去股骨上端得 1/3(保留2/3),制成坐骨神經-小腿得標本。
(b)
完成坐骨神經腓腸肌標本
將脊椎與坐骨神經從腓腸肌上取下,提起腓腸肌得結扎線剪斷跟腱。用粗剪剪去膝關節以下部位,便制成了坐骨神經—腓腸肌標本(圖 3—1—5B). ⑧ 檢驗標本
用鑷子夾持坐骨神經中樞端,如腓腸肌發生迅速而明顯得收縮,說明標本得興奮性良好。標本浸入盛有任氏液得培養皿中備用。
圖 2-1-5 分離坐骨神經(A)與坐骨神經腓腸標本(B)
[ [7] 注意事項 ①在操作過程中,應給神經與肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影響標本得興奮性。
②標本制成后須放在任氏液中浸泡數分鐘,使標本興奮性穩定,再開始實驗效果會較好。
[8 ] 實驗圖像
[ [10] 結果及分析 ① 搗毀腦脊髓后得蛙應有何表現? ② 制備好得神經肌肉標本為何要放在任氏液中? ③ 如何判斷制備得神經肌肉標本得興奮性? [ 11] 思考題 ① 用各種刺激檢驗標本興奮性時,為什么要從中樞端開始? ② 刺激有幾種形式?
驗實? 實驗二 二
心臟灌流 [1 1] ] [實驗目得] 、1
。法方流灌臟心體離蛙習學?
2、觀察 Na+ 、K + 、Ca 2+ 、H + 、腎上腺素、乙酰膽堿等因素對心臟活動得影響。
[ [2][ 實驗原理]
心臟得正常節律性活動需要一個適宜得內環境(如 Na + 、K + 、Ca 2+ 等得濃度及比例、pH 值與溫度),而內環境得變化則直接影響到心臟得正常節律性活動。在體心臟還受交感神經與迷走神經得雙重支配,交感神經末梢釋放去甲腎上腺素,使心肌收縮力加強,傳導速度加快,心率加快;迷走神經末梢釋放乙酰膽堿,使心肌收縮力減弱,心肌傳導速度減慢,心率減慢。將失去神經支配得離體心臟保持于適宜得理化環境中(如任氏液),在一定時間內仍能產生自動節律性興奮與收縮.而改變任氏液得組成成分,離體心臟得活動就會受到影響。
[3] [實驗對象]
蛙?[4] [實驗藥品] 、素腺上腎 00001:1、lCK%1、2lCaC%2、lCaN%56、0、液氏任?1:10000 乙酰膽堿 [5] [儀器與器械]
計算機生物信號采集與處理系統(或二道生理記錄儀)、張力換能器、蛙類常用手術 器械一套、玻璃分針、蛙板、蛙釘、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、滴管(7支)、試劑瓶( 7個)、燒杯、雙凹夾、萬能支架、細線。
[ [6] ] [實驗方法與步驟]
1、標本得制備
(1)離體蛙心標本制備(斯氏蛙心插管法)
取蟾蜍一只,打開胸腔,暴露心臟。在主動脈干下方穿雙線,一條在左主動脈上端結扎作插管時牽引用;另一根在動脈球上方打一活結備用
(用以結扎與固定插管)。
玻璃分針將心臟向前翻轉,在心臟背側找到靜脈竇,在靜脈竇以外得地方做一結扎(切忽扎住靜脈竇),以阻止血液繼續回流心臟(也可不進行此操作)。
圖3—4—1 插管進入心室示意圖 左手提起左主動脈上方得結扎線,右手持眼科剪在左主動脈根部(動脈球前端)沿向心方向剪一斜口,將盛有少許任氏液、大小適宜得蛙心插管由此開口處輕輕插入動脈球。當插管尖端到達動脈球基部時,應將插管稍向后退(因主動脈內有螺旋瓣會阻礙插管前進),并將插管尾端稍向右主動脈方向及腹側面傾斜,使插管尖端向動脈球得背部后方及心尖方向推進,在心室收縮時經主動脈瓣進入心室(見圖 3-4—1)。注意插管不可插得過深,插管得斜面應朝向心室腔,以免插管下口被心室壁堵住。
若插管中任氏液面隨心室得收縮而上下波動,則表明插管進入心室,可將動脈球上已準備好得松結扎緊,并固定于插管側面得鉤上,以免蛙心插管滑出心室。剪斷結扎線上方得血管,輕輕提起插管與心臟,在左右肺靜脈與前后腔靜脈下引一細線并結扎(參考圖 3—4-1),于結扎線外側剪去所有相連得組織則得到離體蛙心。此步操作中應注意靜脈竇不受損傷并與心臟連結良好.最后,用任氏液反復換洗插管內得任氏液,直到插管中無殘留血液為止。此時,離體蛙心標本制備成功,可供實驗. ②左手拉住腹主動脈上結扎線頭,于動脈球上剪一小口,將裝有魚用生理鹽水得得蛙心套管插入動脈球,并順勢推入心室,此時可以瞧到套管內得液面隨心臟搏動而上下移動。用滴管不斷更換套管中得灌流液,沖洗心室直至沒有血液為止,束緊備用線連同套管尖端一起結扎,并將線頭系在套管壁上得小突起上,達到固定作用。最后剪斷腹主動脈,提起心臟用線盡量遠離靜脈竇將其她血管結扎。在結扎外方剪斷各組織.此時心臟完全離體,借灌流液而正常搏動。
、2
接連置裝驗實? 固管插心蛙將2-4—3 圖按?定于支架上,在心室舒張時將連有一細線得蛙心夾在心臟舒張時夾住心尖,并將細線以適宜得緊張度與張力換能器相連。張力傳感器得輸出線與計算機生物信號采集處理系統或二道生理記錄儀得輸入通道相連。
圖3—4-2 蛙心灌流得記錄儀描記裝置 3.實驗項目
(1)記錄心臟在只有任氏液時得收縮曲線,觀察心率及收縮幅度,并將其作為正常對照。
(2)Na+得作用:用吸管吸出插管中得任氏液后,換以等量得 0、65%氯化鈉溶液,記錄并觀察心跳得變化。有變化出現時,應立即將插管內液體吸出,并以等量任氏液換洗 2~3次,至心跳恢復正常。
)3(
,中液流灌入加液溶鈣化氯得%2 滴 2~1將:用作得+2aC?記錄并觀察心跳變化。有變化出現時,應立即以等量任氏液換洗數次,至心跳曲線恢復正常.
(4)K+得作用:將 1~2滴 2%得氯化鉀溶液加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現時,應立即以等量任氏液換洗數次,至心跳曲線恢復正常。
(5)腎上腺素得作用:將 1~2 滴 1:10000 腎上腺素加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現時,應立即以等量任氏液換洗數次,至心跳曲線恢復正常。
(6)乙酰膽堿得作用:將 1~2滴 1:10000 乙酰膽堿加入灌流液中,記錄并觀察心跳變化。有變化出現時,應立即以等量任氏液換洗數次,至心跳曲線恢復正常。
[7] [注意事項]
1、制備離體心臟標本時,勿傷及靜脈竇。
2、蛙心夾應在心室舒張期一次性夾住心尖,避免因夾傷心臟而導致漏液.
3、每一觀察項目都應先描記一段正常曲線,然后再加藥并記錄其效應.加藥時應在心跳曲線上予以標記,以便觀察分析.
4、各種滴管應分開,不可混用.
5、在實驗過程中,插管內灌流液面高度應保持恒定;儀器得各種參數一經調好,應不再變動。、6
.果結驗實得后加添量劑物藥意注切密并,加滴量適再可,顯明不果效若后藥給?
給藥量必須適度,加藥出現變化后,就應立即更換任氏液,否則會造成不可挽回得后果,尤其就是 K+,H+稍有過量,即可導致難以恢復得心臟停跳。
7、標本制備好后,若心臟功能狀態不好(不搏動),可向插管內滴加 1~2 滴 2%CaCl2或 1:10000 腎上腺素,以促進(起動)心臟搏動。在實驗程序安排上也可考慮促進與抑制心臟搏動得藥物交換使用。
8、謹防灌流液沿絲線流入張力傳感器內而損壞其電子元件。
[8 8] [ 問題與解釋]
1、插管插入后,管中得液面不能隨心臟搏動而波動,或波動幅度不大,影響結果得觀察。
(1)
插管插到了主動脈得螺旋瓣中,未進入心室。
(2)插管插到了主動脈壁肌肉與結締組織得夾層中. )3(
。壁室心到觸抵端尖管插? ?(4)插管尖端被血凝塊堵塞。
2、插管后,心臟不跳動. )1(
。損受竇脈靜或室心?
(2)插管尖端深入心室太多;或尖端太粗,心臟太小(魚類容易出現)影響到心室臟得收縮。
(3)心臟機能狀態不好。
[9] [ 實驗 圖像] 氯化鈉 氯化鈣 氯化鉀 腎上腺素 乙酰膽堿
[ [10 ] [實驗結果]
剪貼記錄曲線,并對實驗結果進行分析討論。
驗實? 實驗 三
影響尿 液 生成得因素 [ [1 ]
[] 實驗目得]
動對素因理生同不察觀,法方得流引管套管尿輸或管套胱膀用習學?物尿量得影響。加深對尿生成調節得理解。]2[? ] [ 實驗原理]
位單腎過流液血是就尿?
時經過腎小球濾過,腎小管重吸收與分泌而形成得,凡對這些過程有影響得因素都可影響尿得生成。腎小球得濾過作用取決于腎小球得有效濾過壓,其大小取決于腎小球毛細血管血壓,血漿得膠體滲透壓與腎小囊內壓。影響腎小管重吸收作用主要就是管內滲透壓與腎小管上皮細胞得重吸收能力,后者又為多種激素所調節。
[ [3] [實驗對象]
兔 [ [4 ] [實驗藥品] 醫用酒精、生理鹽水、溫熱得生理鹽水,利尿激素。
[ 5] [儀器與設備]
計算機生物信號采集處理系統(或二道生理記錄儀、電子刺激器)、壓力換能器、保護電極、記滴器、恒溫浴槽、哺乳動物手術器械一套、兔手術臺、氣管插管、膀胱導管(或輸尿管導管)、動脈插管、注射器(1 ml、20 ml)及針頭、燒杯、試管架及試管、酒精燈等。
[6 ] [ 方法與步驟]
1、標本得制備
(1)實驗兔在實驗前應給予足夠得菜與飲水.
(2)稱重動物,耳緣靜脈注射20%得氨基甲酸乙酯溶液(5 ml·kg-1體重)進行麻醉,待動物麻醉后仰臥固定于手術臺上。
(3)在頸部手術
①暴露氣管,施氣管插管;②分離左側頸總動脈,按常規將充滿肝素生理鹽水得動脈插管插入其內,通過血壓換能器連至記錄裝置,描記血壓。③分離右側得迷走神經,穿線備用,用溫生理鹽水紗布覆蓋創面。
(4)尿液得收集可選用膀胱導管法或輸尿管插管法。①、
骨恥自
法尿導胱膀?聯合上緣向上沿正中線作 4 cm長皮膚切口,再沿腹白線剪開腹壁及腹膜(勿傷腹腔臟器),找到膀胱,將膀胱向尾側翻至體外(勿使腸管外露,以免血壓下降)。再于膀胱底部找出兩側輸尿管,認清兩側輸尿管在膀胱開口得部位。小心地從兩側輸尿管下方穿一絲線,將膀胱上翻,結扎膀胱頸部。然后,在膀胱頂部血管較少處作一荷包縫合,再在其中央剪一小口,插入膀胱導管,收緊縫線、結扎固定.膀胱導管得喇叭口應對著輸尿管開口處并緊貼膀胱壁。膀胱導管得另一端通過橡皮導管與直管連接至記滴器,并在它們中間充滿生理鹽水。②
管尿輸?插管法
沿膀胱找到并分離兩側輸尿管,在靠近膀胱處穿線將它結扎;再在此結扎前約 2厘米得近腎端穿一根線,在管壁剪一斜向腎側得小切口,插入充滿生理鹽水得細塑料導尿管并用線扎住固定,此時可瞧到有尿滴滴出.再插入另一側輸尿導管.將兩插管并在一起連至記
滴器。手術完畢后,用溫生理鹽水紗布覆蓋腹部切口。
圖 3—7—1 兔輸尿管及膀胱導尿法 1、輸尿管 2、插膀胱導管部位 3、膀胱導管 2、實驗項目 (1)記錄正常情況下每分鐘尿分泌得滴數。
(2)耳緣靜脈注射38℃得 0、9%NaCl 溶液 20ml,觀察尿量得變化。
(3)耳緣靜脈注射去利尿激素 1ml,觀察尿量得變化.)4(切,毛剪部腹上:術手部腹上?開胸骨劍突部位得皮膚,沿腹白線切開長約 2 cm得切口,小心分離、暴露劍突軟骨及骨柄,用金冠剪剪斷劍骨柄,將縛有長線得金屬鉤鉤于劍突中間部位,線得另一端連張力換能器, 記錄呼吸。
(5)迷走神經得作用:切斷一側迷走神經,呼吸運動有何變化? [ ]7[]項事意注? [注意事項]
1、選擇家兔體重在 2、5—3、0kg 左右,實驗前給兔多喂菜葉,或用橡皮導尿管向兔胃內灌入 40~50 ml清水,以增加基礎尿量.
2、手術動作要輕揉,腹部切口不宜過大,以免造成損傷性閉尿.剪開腹壁避免傷及內臟。
3、因實驗中要多次進行耳緣靜脈注射,因此要注意保護好兔得耳緣靜脈。應從耳緣靜脈得遠端開始注射,逐漸向耳根部推進.、4
圍周與壁管入插免避意注,時管插管尿輸?得結締組織中;插管要妥善固定,不能扭曲,否則會阻礙尿得排出。、5
得序順驗實?安排就是:在尿量增加得基礎上進行減少尿生成得實驗項目,在尿量少得基礎上進行促進尿生成得實驗項目.一項實驗需在上一項實驗作用消失,血壓、尿量基本恢復正常水平時再開始。
6、刺激迷走神經強度不宜過強,時間不宜過長,以免血壓過低,心跳停止。
[8 ] [問題 分析]
1、開始實驗尚未給藥時,尿量就很少或無尿
(1) 兔體缺水
(2)
兔本身機能狀況低下,
(3)
輸尿管插管未插入輸尿管內,或輸尿管堵塞,或輸尿管扭曲。)4(
過口切部腹?大,引起抗利尿激素分泌,血壓下降,尿量減少。
(5) 氣溫太低,動物未保溫,血管收縮,尿量減少.
[ [9] [實驗 圖像] ] 正常 一側神經被剪 兩側神經被剪 增大無效腔 ]01[? ] [ 實驗結果]
、壓張舒、壓縮收括包(壓血得見所驗實項各錄記,果結驗實貼剪?平均壓)與尿量變化。分析這些變化產生得原因。
[1 11 ] [思考題]
1、靜脈快速注射生理鹽水對尿量有何影響,為什么?
2、靜脈注射利尿激素對尿量有何影響,為什么? 3.迷走神經在節律性呼吸運動中起何作用? 驗實? 實驗四 四 心血管活動得神經體液調節 [1] [ 實驗目得]
學習記錄哺乳動物動脈血壓得直接測定方法,并觀察神經—體液因素對心血管活動得調節。
[ [2] ] [實驗原理]
心 。節調得制機身自與液體、經神受動活管血心,下況情理生常正在?臟受交感神經與副交感神經得支配。心交感神經興奮時,使心率加快、心肌收縮力加強,心內興奮傳導加快,心輸出量增加、動脈血壓升高。心迷走神經興奮時,使心率減慢、心房肌收縮力減弱、房室傳導減慢,從而使心輸出量減少、動脈血壓下降。在神經調節中以頸動脈竇-主動脈弓得減壓反射尤為重要,當動脈血壓升高時,壓力感受器發放沖動增加,通過中樞反射性引起心率減慢、心肌收縮力減弱、心輸出量下降、血管舒張與外周阻力降低,使血壓降低。反之,當動脈壓下降時,壓力感受器發放沖動減少,神經調節過程又使血壓回升。支配血管得交感縮血管神經興奮時,使血管收縮、外周阻力增加、動脈血壓升高。
壓得兔家?力感受器得傳入神經在頸部從迷走神經分出,自成一支,稱為減壓神經,其傳入沖動隨血壓變化而變化.
管血心對們它。節調得素因液體等素腺上腎甲去與素腺上腎受還動活管血心?得作用既有共性,又有特殊性。關鍵取決于心、血管壁上哪一種受體占優勢。腎上腺素對 α與 β 受體均有激活作用,去甲腎上腺素主要激活 α 受體而對 β 受體作用很小,因而使外周阻
力增加,動脈血壓升高,但對心臟得作用要比腎上腺素弱。
[ [3] [實驗對象]
?[ 。兔家? [4] ]
[實驗藥品]
或(脂乙酸甲基氨%02,水鹽理生?3%戊巴比妥鈉),肝素(500 U·ml-1),1:
10000腎上腺素,1:
10000 去甲腎上腺素,1:
10000 乙酰膽堿.
[ 5]
[ 儀器與器械]
計算機生物信號采集處理系統(或二道生理記錄儀、刺激器),兔手術臺,手術器械一套,氣管插管,動脈夾,動脈套管、血壓換能器,保護電極,棉線,紗布,棉球、注射器(50、10、2 ml),支架,雙凹夾.
[ [6 ] [實驗方法與步驟] 1、實驗準備:
(1)麻醉與固定:家兔稱重后,耳緣靜脈緩慢注射 20%氨基甲酸乙酯(5 ml·kg-1)或 3%戊巴比妥鈉(1 ml·kg—1)進行麻醉。當動物四肢松軟,呼吸變深變慢,角膜反射遲鈍時,表明動物已被麻醉,即可停止注射。將麻醉得家兔仰臥位固定于兔手術臺上。
(2)分離頸部神經、血管與插氣管插管
:頸部剪毛,沿頸部正中線切開皮膚 5~7 cm,用止血鉗鈍性分離皮下組織及淺層肌肉,暴露與分離氣管;分離左、右兩側頸總動脈(左頸總動脈盡量分離長些,以做動脈插管用。當向頭端追索到甲狀軟骨上緣,可見到左頸動脈分支為頸外與頸內動脈,在頸內動脈基部有一膨大處,為頸動脈竇。分離右側得迷走神經、交感神經與減壓神經。在分離得氣管、頸總動脈及神經下方各穿一不同顏色得線備用(見5—1)。
圖 3—5-1 頸部分離 (3)
進行氣管插管(圖 3—5-2)
圖 3-5—2 氣管插管示意圖
(4)
進行動脈插管
做插管手術前經耳緣靜脈注射肝素(500 U·kg—1),在左側頸總動脈插入動脈插管(圖3—5—3)。
圖 3-5—3
頸動脈插管示意圖 2.連接實驗裝置:
能換壓血與通三過通管插脈動將
統系理處集采號信物生機算計?器連接,血壓換能器與計算機生物信號采集處理系統得壓力通道連接;刺激電極與系統得刺激輸出連接;減壓神經得記錄電極導線與系統得一個通道連結。啟動計算機生物信號采集處理分析系統,按系統程序提示進行血壓信號定標,調整放大增益。
3、實驗項目 )1(
變者二察觀,形波壓血脈動與形波電放經神壓減下況情常正錄記?化關系,注意觀察減壓神經得群集性放電與血壓得波動就是否同步?每一群集性放電持續時間?血壓正常值就是多少?同時辨認血壓波得一級波與二級波,三級波(圖 7、10-2):
圖 3—5—4 兔頸總動脈得血壓曲線(示波器記錄)
一級波(心搏波):由心室舒縮活動所引起得血壓波動,心縮時上升,心舒時下降,其頻率與心率一致。
二級波(呼吸波):由呼吸運動所引起得血壓波動,吸氣時血壓先下降,繼而上升,呼氣時血壓先上升,繼而下降,其頻率與呼吸頻率一致. 三級波:不常出現,可能由心血管中樞得緊張性活動得周期變化所致。)2(
動總頸閉夾?脈
用動脈夾夾閉右側頸總動脈 10~15 s,觀察血壓與減壓神經放電得變化。在出現一段明顯變化后,突然放開動脈夾,血壓又有何變化。
(3)牽拉頸總動脈
手持左側頸總動脈上得遠心端結扎線,向心臟方快速牽拉 3 s.觀察血壓與減壓神經放電得變化.若持續牽拉,血壓與減壓神經放電會有何變化? )4(
注脈靜?射乙酰膽堿
待血壓基本穩定后, 由耳緣靜脈注入 1:10000 乙酰膽堿0、2~0、3 ml,觀測血壓與減壓神經放電得變化.注意動脈血壓降低到何種程度時,群集型放電才減少?或完全停止及其恢復過程。
(5)靜脈注射去甲腎上腺素
待血壓基本穩定后,由耳緣靜脈注入 1:10000 去甲腎上腺素 0、2~0、3 ml,觀測血壓與減壓神經放電得變化。注意何時沖動發放增多?何時分辨不出群集形式?直到血壓繼續增加而發放沖動得頻率不再增加(圖 3—5—5)。
圖 3—5-5 家兔減壓神經放電與動脈血壓得關系(示波器記錄)
A 注射 Ed 后(1:10000)1ml 10~15s 后,血壓上升,減壓神經放電增加,最后變為持續發放(示波器記錄)
B 注射Ach(1:10000)0、3ml 10~15s 后,血壓下降,減壓神經放電頻率逐漸減少最后停止(示波器記錄)
(6)刺激迷走神經外周端
待血壓基本穩定后,結扎并剪斷右側迷走神經,電刺激迷走神經外周端,觀察血壓與心率得變化.待血壓變化明顯時停止刺激。
)7(
激刺?減壓神經
在血壓基本恢復正常后,雙重結扎減壓神經,并在兩結扎線中間剪斷減壓神經,分別用中等強度電流刺激減壓神經得中樞端與外周端,并同時作標記。觀察心率與血壓變化,待血壓出現較明顯變化后,停止刺激。
[7] [注意事項]
(1)本實驗麻醉應適量,麻醉藥注射速度要慢,同時注意呼吸變化,以免過量引起動物死亡。如果實驗時間過長,動物蘇醒掙扎,可適量補充麻醉藥物。
(2)儀器與動物要接地,并注意適當得屏蔽。
(3)每觀察一個項目,必須待血壓與心率恢復正常后,才能進行下一個項目。
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?每次靜脈注射完藥物后應立即推注 0、5 ml 生理鹽水,以防止藥液殘留在針頭內及局部靜脈中而影響下一種藥物得效應
(5)實驗中注射藥物較多,要注意保護耳緣靜脈。
(6)實驗結束后,必須結扎頸總動脈近心端后再拔除動脈插管。
[8 8] ] [實驗結果]
剪貼各項記錄曲線,每項實驗記錄必須包括實驗前得對照、實驗開始得標記及實驗項目 得注釋。比較各種處理前后血壓與減壓神經放電有何變化,分析血壓與減壓神經放電之間存在何種關系。
[9 9] [ 實驗曲線] [ 10] [思考題] 1、正常血壓曲線得一級波、二級波及三級波各有何特征?其形成機制如何? 2、動物動脈血壓就是怎樣形成得?如何受神經體液調節? 3.短時間夾閉右側頸總動脈(未插管一側)對全身得血壓與心率有何影響?若夾閉部位在頸動脈竇上,影響就是否相同?
4、試分析以上各種實驗因素引起動脈血壓與心率變化得機制。
5、如何證明減壓神經就是傳入神經?
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