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2009—2010年泰州市區從業人員攜帶的沙門菌菌型分布和藥敏分析

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【摘 要】目的:了解泰州市區從業人員攜帶沙門菌菌型分布和藥物敏感情況,為制定有效防治措施及指導合理用藥提供科學依據。方法:對我中心2009-2010年度飲服從業人員健康體檢中初篩分離到的148株疑似沙門菌株進行系統生化和血清分型鑒定并采用紙片擴散法( K- B)檢測抗生素耐藥性, 依據NCCLS規定判斷結果。結果:2009-2010年度檢出的沙門菌中 ,E群占62.96% ,D群占12.96% , B群占10.18%、 C群占8.33%,A群和其他群各占2.78%,其中中以E群的山夫登堡和火雞沙門菌為優勢菌型,分別為29.63%、25.00%。108株沙門菌藥敏實驗表明沙門菌對頭孢噻肟、環丙沙星、復方新諾明高度敏感,但有耐藥株出現;諾氟沙星、氨芐青霉素、慶大霉素、四環素、萘啶酸出現不同程度耐藥,其中萘啶酸耐藥率達100.00%,結論:泰州市區從業人員攜帶沙門菌血清型以山夫登堡和火雞沙門菌為主,耐藥分析提示應加強沙門菌耐藥性監測,對合理選擇及使用抗生素提供指導。

【關鍵詞】沙門菌;菌型分布;耐藥性;血清學鑒定

沙門氏菌在自然界中有2000多種血清型[1],在我國檢出的沙門菌血清型約有200多種[2],幾乎所有的血清型都會污染食物引起發病, 是人畜共患的腸道病原菌。飲食和服務行業的從業人員帶菌往往會引起食物中毒和腸道傳染病的發生或流行。為了解泰州市飲食、公共場所服務的從業人員腸道沙門氏菌帶菌和藥物敏感狀況,進一步加強飲食、公共場所服務

行業的衛生監督管理及合理的用藥指導。本文對泰圳市2009-2010年度從業人員健康體檢初步分離出的148株疑似沙門菌進行系統生化和血清學鑒定,并對沙門菌株進行耐藥性試驗分析,現將結果報告如下。

1 材料和方法

1.1 菌株來源 菌株系泰州市疾病預防控制中心2009-1010年對38018名從業人員健康體檢的肛拭標本按國標經初步培養分離獲得的148份疑似菌株(2009年80株,2010年68株)。菌株收集于MicobankTM凍存管中置-75℃冰箱保存。

1.2 主要試劑與儀器 營養肉湯、SS 培養基、MIU、 三糖鐵培養基(北京陸橋生物技術有限責任公司)、MH瓊脂和10種藥敏紙片(氨芐西林、阿莫西林 /克拉維酸、頭孢噻吩、環丙沙星、萘啶酸、諾氟沙星、頭孢噻肟、 慶大霉素、 復方新諾明、四環素由江蘇省疾病預防控制中心提供(由北京天壇藥物生物技術開發公司生產),細菌鑒定儀由法國梅里埃生物制品有限公司生產,沙門菌診斷血清系衛生部蘭州生物制品研究所生產。均在有效期內使用。

1.3 菌株復活、系統生化和血清學鑒定 將含收集菌株的MicobankTM迅速置于38℃恒溫培養箱中融化15分鐘,用無菌接種環挑2-3粒吸附菌株的磁珠放入營養肉湯增菌液中37℃ 培養 18 h后,劃線轉種SS瓊脂平板 , 37℃培養 24 h后 ,挑取可疑菌落進行革蘭染色鏡檢 ,將革蘭陰性桿菌及初步生化符合沙門菌特點的單個菌落純培養物進一步經ATB自動生化系統鑒定 ,再將系統生化鑒定結果屬于沙門菌屬的單個菌株進行血清學鑒定和分型。

1.4 藥敏試驗 試驗方法和判斷標準均按美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS ) 標準,采用K-B 紙片擴散法,用大腸埃希菌ATCC25922 作為標準菌株[3] 。

2結果

2.1菌株鑒定結果 148份疑似菌株經系統生化和血清學鑒定,檢出沙門菌株108株。其中2009年75株沙門菌,5株弗勞地枸櫞酸桿菌;2010年33株沙門菌,25株弗勞地枸櫞酸桿菌,5株奇異變形桿菌,5株系統生化提示沙門菌屬,但A-F-O多價不凝。

2.2帶菌狀況分析 從38018份標本中,檢出腸道沙門菌帶菌者108例,平均檢出率0.28%,其中2009年從業人員18650人,檢出沙門菌75株 ,檢出率為0.4%;2010年從業人員19368人,檢出沙門菌33株,檢出率0.17%,較上年度檢出率降低,經卡方檢驗兩者具有顯著性差異 ( χ2= 18.02,P<0.05)。導致沙門菌檢出率降低可能與以下因素有關:由于生活條件的改善導致個人防護意識增強,衛生習慣的改變;衛生監管部門的管理力度加強等。在108例帶菌者中,男性36人,女性72人,可能與該行業中女性占大多數有關。

2.3沙門菌群型分布 根據ATB系統生化反應,血清學凝集,將108株沙門菌分為6個群(E群分E1,E4亞群),21個血清型。E群所占比例最高,68株占62.96%,D群居第2位,占12.96%,其次是B群占10.18%、C群8.33%、A群和其他群分別占2.78%。(表1)

3討論

本實驗結果顯示,在疑似沙門菌株中除沙門菌外還檢出30株弗勞地枸櫞酸桿菌、5株奇異變形桿菌,其原因:同屬腸桿菌科其抗原有部分相同,甚至少數種完全相同,其中弗勞地枸櫞酸桿菌與沙門菌間抗原關系可能更密切些,因此細菌與診斷血清間交叉凝集反應現象甚為普遍。相關報道也甚為不少[4-6]。這提示我們應對這兩種條件致病菌加以關注,因為他們也會引起食源性感染的發生。另外,有6株未鑒定出血清型,推測原因是可能受到血清分型試劑的限制,或與菌種凍存造成部分抗原缺失有關,或者是非A-F群沙門菌(有待進一步分析研究),由于沙門菌血清型種類繁多,新的血清型又不斷出現,單純的血清分型已不能滿足需要,迫切需要新分型標準和檢驗方法來研究沙門菌的生物學特性。

本研究發現泰州市區飲服從業人員沙門菌平均檢出率為0.28%,與有關報道基本相符[7]。同時,從業人員攜帶的沙門菌主要菌型是E群中的山夫登堡、火雞沙門菌,分別占29.63%(26/108)和25.00%(27/108)以及D群中的都伯林沙門菌。該結果與我市2011年度哨點醫院主動監測分離到的沙門菌主要血清型大體相符[8],但與其他地方還存在地區差異[9-10]。隨著服務業的迅速發展,地區間物資交流頻繁,外來人口的增多,特別飲服從業人員的流動性很強導致沙門氏菌在該人群的分布有很大的不確定性,一旦外來少見菌型的進入,容易引起廣泛的感染,導致嚴重的公共衛生事件[11]。因此衛生部門必須加強食品和飲水環境衛生管理,特別是飲服從業人員的健康管理,要連續長期監測及時發現和治療帶菌者,才能最大限度地防止從業人員帶菌污染食品,而造成疾病的流行與傳播。

本文藥敏結果顯示,108株沙門菌對頭孢噻肟、復方新諾明、阿莫西林/棒酸的耐藥率為0,對環丙沙星耐藥率僅僅為7.41%,提示本地可用這幾種藥物有效治療沙門菌感染。而頭孢噻吩、諾氟沙星、氨芐青霉素、慶大霉素、四環素、萘啶酸出現不同程度耐藥,其中萘啶酸完全耐藥達100.00%,這情形與吳偉元等人[12]的研究結果相似,但與王曉泉等人的研究稍有差異[13],主要是出現對諾氟沙星耐藥菌株,應引起重視。因為氟喹諾酮類和第三代頭孢類藥物是目前臨床治療沙門菌感染的一線藥物[14,15]。本實驗中阿莫西林/棒酸的中介率最高達21.30%,表明在我市其存在向耐藥發展趨勢。目前沙門菌耐藥現象日趨嚴重,大多與抗生素的廣泛應用或使用不當有關,尤其多重耐藥菌株的產生,可能是由于耐藥質粒傳遞的結果,故定期對本地常見常見腸道感染的沙門菌的類型分析和藥物敏感性檢測,對指導臨床合理正確使用抗菌藥物,有效控制沙門菌引起的急性腹瀉及減少耐藥株的出現意義極為重大。

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