[摘要] 目的：比較簡易液基涂片技術與傳統涂片技術在痰液細胞學的制片效果及痰癌細胞的診斷陽性率。方法：收集患者清晨咳嗽后的痰液置于封閉塑料瓶中，分為兩組，一組做傳統涂片，另一組用簡易液基涂片方法制片。光鏡下觀察比較兩者的制片質量并評估優劣。結果：110例標本中，臨床最后診斷42例（38.18%）為陽性，68例（61.82%）為陰性。簡易液基涂片中找到癌細胞34例（30.91%），可疑癌細胞5例（4.54%）中除1例臨床診斷為陰性要求隨訪外都為陽性患者；傳統涂片中找到癌細胞20例（18.18%），可疑癌細胞14例（12.73%），其中5例液基涂片診斷同為可疑，另7例臨床為陽性患者，另2例臨床診斷為陰性需要隨訪。結論：簡易液基涂片技術較傳統涂片技術能有效地提高痰液細胞學制片質量及痰癌細胞診斷的陽性率。
[關鍵詞] 液基涂片技術；傳統涂片；痰液；肺癌
[中圖分類號] R734[文獻標識碼]Ａ [文章編號]1673-7210（2011）04（a）-048-02
Application of simple liquid based smear in sputum examination
CHEN Rong1, JIANG Chunfan2
1.Department of Pathology, Wuhan Medical Treatment Center, Wuhan 430023, China; 2.Department of Pathology, the Central Hospital of Xiangfan City, Xiangfan 441021, China
[Abstract] Objective: To compare the positive ratio of simple liquid based smear and traditional smear in sputum cytology. Methods: The deeply inside sputum of patients in the morning were collected, and were divided into two groups. One was done by the traditional cytology, the other was done by simple liquid based smear. The results under the microscope and the qualities of both slides were compared to evaluate which was best. Results: 110 cases of samples in the finally clinical diagnosis, 42 cases (38.18%) for positive, 68 cases (61.82%) for negative. Simple liquid base smear found in 34 patients (cancer cells, 30.91%), suspicious cancer cells in 5 patients (4.54%) in all the cases clinical diagnosis for negative requirements follow-up outside all positive for patients; traditional smear found in 20 patients (18.18%) cancer cells, suspicious of 14 cases (12.73%), of which 5 cases were diagnosed with liquid base smear as suspicious, the other 7 cases clinical tested positive for the patient, another 2 cases clinical diagnosis for negative need follow-up. Conclusion: Simple liquid based smear is much better than traditional smear in sputum cytology slide quality and positive ratio of carcinoma cells.
[Key words] Liquid base smear technology; Traditional smear; Sputum; Lung cancer
肺癌在我國的發病率及死亡率一直很高，痰液中查找癌細胞無論是對肺癌的篩查還是診斷都是簡易且無創傷的有效手段之一。在宮頸癌前病變方面，液基薄層技術較傳統刮片檢查能大大提高陽性率，但是對于痰液檢查，新柏氏TCT等液基薄層制片因其制作過程繁瑣且成本較高，限制了其廣泛應用。本實驗將110例痰液先傳統涂片后再用簡易液基涂片，比較其制片效果及診斷結果。
1 材料與方法
1.1 材料
選取我院（武漢市醫療救治中心）2009年6月～2010年5月因肺部陰影待查的住院患者送檢痰標本110例，其中，男67例，女43例；年齡26～87歲。
1.2 器械與方法
患者晨起漱口后咳出肺深部痰，將痰液收集到可密封塑料瓶中，先用傳統涂片方法仔細挑取可疑痰液制成涂片2張（每張直徑約1.8 cm）；剩余標本用簡易液基涂片方法立即按1∶3至1∶5的比例注入混有消化酶的固定液，振蕩固定120 min，離心5 min（1 000 r/min），棄上清，沉淀加入適量50%乙醇固定液混勻離心棄上清，根據標本情況再如此清洗1～3次。最后加2~5滴固定液混勻沉淀涂薄片2張（每張直徑約1.8 cm），剩余標本保存。涂片均用95%酒精固定后HE（或巴氏）染色。光鏡下觀察診斷。
1.3 統計學方法
采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。
2 結果
2.1 兩組涂片質量鏡下比較
簡易液基涂片中背景干凈，無黏液及過多的紅細胞和炎細胞，上皮細胞較多，且分散無重疊，陽性涂片中癌細胞分散，形態清楚，容易辨認；而傳統涂片中見大量黏液絲，紅細胞及炎細胞較多，且與上皮混雜重疊，上皮細胞總量差別很大，陽性涂片中癌細胞較少且重疊、成堆或呈線狀分布，需仔細尋找辨認。見圖1。
2.2 兩組診斷結果比較
110例標本中，臨床診斷42例（38.18%）為陽性，68例（61.82%）為陰性。本實驗簡易液基涂片中可見癌細胞34例（30.91%），可疑癌細胞5例（4.54%），其中除1例臨床診斷為陰性需隨訪觀察外均為陽性患者（即癌與可疑癌共38例為陽性，其與臨床的符合率達90.48%）；傳統涂片中可見癌細胞20例（18.18%），可疑癌細胞14例（12.73%），其中5例液基涂片同為可疑（包括1例臨床診斷為陰性患者），其中7例臨床為陽性，另外2例臨床診斷為陰性需隨訪觀察（即癌與可疑癌共31例為陽性，其與臨床的符合率達73.81%）。簡易液基涂片的診斷結果與傳統涂片的診斷結果比較差異有統計學意義（χ2=8.06，P<0.05）。見表1。
3 討論
痰液中查找癌細胞無論是對肺癌的篩查還是診斷都是簡易且無創傷的有效手段之一。傳統涂片是憑經驗將痰液中可疑部分挑出后直接涂片于玻片上，再用95%的酒精固定，其制片方法簡單易操作，臨床普遍使用，但是這種涂片方法存在一些問題：①從痰標本的收集到制作固定之間有一定時間，細胞容易自溶變性。②其往往只能獲取局部少量標本（可能只為其陰性成分）涂片，而大部分（可能包含其陽性成分）的標本被丟棄。③此方法容易造成涂片厚薄不勻，背景中黏液、炎細胞、壞死等混雜重疊影響癌細胞的觀察診斷（圖1a、b）。本試驗中傳統制片的癌細胞陽性率偏低及可疑癌的例數居多，可能與其涂片的質量有關。
現在有的醫院采用如新柏氏TCT等液基薄層制片技術用于宮頸、痰、胸腹水等細胞學檢查。這雖然克服了傳統涂片的不足，提高了涂片質量，使診斷的陽性率大幅提高，但其制片耗時耗力，且費用較高。本試驗采用的簡易液基涂片技術，一方面采用液基固定保存標本，使用機械振蕩與酶使細胞從黏液中分離出來，并通過清洗離心去除黏液和部分炎細胞、紅細胞及壞死等，使有診斷價值的上皮細胞集中并涂片，從而達到較好的涂片效果（圖1a、c）。另一方面，同其他液基薄層技術相比，免去部分耗材儀器設備，制片時間有所縮短，且費用大大降低。
從本試驗來看，簡易液基涂片診斷癌34例較傳統涂片的20例有明顯差異；傳統涂片診斷可疑癌14例遠高于簡易液基涂片的5例；若匯總癌與可疑癌，簡易液基涂片的陽性患者與臨床的符合率達90.48%，要高于傳統涂片的73.81%。綜上所述，與傳統涂片技術相比，簡易液基涂片技術能提供較高質量的痰細胞涂片，從而使痰液中癌細胞的診斷陽性率得到提高。
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（收稿日期：2011-01-19）
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